กล้องจุลทรรศน์ 3 กระบอกตาเทคนิคฟลูออเรสเซนต์ สำหรับ FISH 

(Trinocular Fluorescence in situ Hybridization Microscope)

 

      กล้องจุลทรรศน์ 3 กระบอกตาเทคนิคฟลูออเรสเซนต์ สำหรับ FISH เป็นกล้องจุลทรรศน์ที่มีแหล่งแสงและเลนส์รวมแสงอยู่ด้านบน เหนือแท่นวางตัวอย่าง ในขณะที่เลนส์ใกล้วัตถุอยู่ด้านล่างของแท่นวางตัวอย่าง โดยอาศัยเทคนิคการเรืองแสงของสารหรือสีที่ใช้ย้อมตัวอย่าง ส่วนใหญ่ใช้ในการตรวจหา DNA ที่มีลำดับ nucleotide ที่จำเพาะในเซลล์ที่ต้องการตรวจ โดยใช้ DNA probe ที่มีลำดับของ nucleotide ที่สามารถจับกับ DNA ที่อยู่บนโครโมโซมต้องการตรวจได้ โดยมีการติด reporter molecule ไว้กับ probe ซึ่ง reporter molecule นี้อาจใช้เป็นสารกัมมันตรังสี เอนไซม์ หรือสารเรืองแสง ในการตรวจด้วยวิธี FISH จะใช้ reporter molecule เป็นสองกลุ่ม ได้แก่

1. Direct FISH จะใช้สารเรืองแสง เช่น rhodamine ทำหน้าที่เป็น reporter molecule ติดกับ probe โดยตรง

2. Indirect FISH จะใช้เป็น hapten-labelled probe โดยใช้ biotin หรือ digoxigenin ติดกับ probe ซึ่งในขั้นตอนการอ่านผลจะต้องมีการใช้สารที่สามารถจับกับ biotin (คือ anti-biotin antibody หรือ avidin) และ digoxigenin (คือ anti-digoxigenin antibody) ที่ติดด้วยสารเรืองแสง เช่น fluorescein isothiocyanate (FITC) เป็นต้น